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單克隆抗體技術原理以及制備過程
點擊次數:46 更新時間:2025-03-11

單克隆抗體技術原理如下:

由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體,稱為單克隆抗體。通常采用雜交瘤技術來制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術是在細胞融合技術的基礎上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。用具備這種特性的單個雜交瘤細胞培養成細胞群,可制備針對一種抗原表位的特異性抗體即單克隆抗體。


單克隆抗體技術原理以及制備過程


單克隆抗體的制備過程

單克隆抗體的大量制備主要采用動物體內誘生法和體外培養法。

(1)體內誘生法取BALB/c小鼠,首先腹腔注射0.5ml液體石蠟或降植烷進行預處理。1-2周后,腹腔內接種雜交瘤細胞。雜交瘤細胞在小鼠腹腔內增殖,并產生和分泌單克隆抗體。約1-2周,可見小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹水,即可獲得大量單克隆抗體。

(2)體外培養法將雜交瘤細胞置于培養瓶中進行培養。在培養過程中,雜交瘤細胞產生并分泌單克隆抗體,收集培養上清液,離心去除細胞及其碎片,即可獲得所需要的單克隆抗體。但這種方法產生的抗體量有限。各種新型培養技術和裝置不斷出現,大大提高了抗體的生產量。

單克隆抗體技術可用于探討

①蛋白質的精細結構;

②淋巴細胞亞群的表面新抗原;

③組織相容性抗原;

④激素和藥物的放射免疫(或酶免疫)分析;

⑤腫瘤的定位和分類;

⑥純化微生物和寄生蟲抗原;

⑦免疫治療和與藥物結合的免疫-化學療法(“導d彈"療法,利用單克隆抗體與靶細胞特異性結合,將藥物帶至病灶部位。因此,單克隆抗體可直接用于人類疾病的診斷、預防、治療以及免疫機制的研究,為人類惡性腫瘤的免疫診斷與免疫治療開辟了廣闊前景。

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